更新時間:2021-11-22
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心,
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,標本融化后仍然保?-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融,不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
由于兔子白介素1可溶性受體IIL-1sRELISA試劑盒所檢測的樣本不一定是連續(xù),所以實驗中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,4℃可保存1個 月,其余不用試劑應包裝好或蓋好,在做樣本檢測前要有一個完整的計劃,如標本編號、所測項目、目的等,操作時盡量使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
注意事項:
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
常見ELISA試劑盒:
動物細胞因子、補體、白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體等科研ELISA試劑盒
本司ELISA試劑盒五大特點:
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