甘油三酯試劑盒的原理主要基于酶法反應,通過一系列酶促反應將甘油三酯轉化為可測量的有色產物。甘油三酯試劑盒利用酶促反應將甘油三酯轉化為可測量的信號,通過光譜分析確定其濃度。這一原理不僅確保了測試的準確性和靈敏度,還使得操作過程簡便快捷。
1、甘油三酯的水解:在脂蛋白酯酶(LPL)的作用下,血清中的甘油三酯(TG)被水解成甘油和脂肪酸。
2、甘油的磷酸化:生成的甘油隨后在甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)的作用下被磷酸化,形成3-磷酸甘油(G-3-P)。
3、氧化顯色反應:3-磷酸甘油在磷酸甘油氧化酶(GPO)的催化下被氧化,然后與過氧化物酶(POD)、(4-AAP)和4-氯酚(三者合稱PAP)發(fā)生顯色反應,產生紅色醌類化合物。
4、吸光度測定:在特定波長處(如546nm或570nm),通過監(jiān)測反應混合物的吸光度值,可以計算出樣品中甘油三酯的含量。
試劑盒包含Tris緩沖液、4-氯酚、ATP、(4-AAP)等。試劑盒中的酶如LPL、GPO、GK和POD具有高活性,確保了測試的準確性和靈敏度。
一、使用方法
1、樣品準備:使用新鮮無溶血的血清作為樣品。
2、操作步驟:按照說明書的指導,將R1和R2混合制備工作液,然后在特定波長和溫度下進行比色分析。
二、注意事項
1、安全措施:實驗過程中需佩戴手套和口罩,避免接觸易揮發(fā)性物質。
2、振蕩要求:加AK071-B后需劇烈震蕩,以保證待測液中甘油三酯得到充分提取。
三、保存條件
1、原裝試劑:在2~8℃避光保存,有效期為36個月。
2、復溶后試劑:在2~8℃保存穩(wěn)定2周,在15~25℃保存穩(wěn)定2天。
總的來說,甘油三酯試劑盒是一種精確且方便的工具,用于醫(yī)學診斷和生物化學研究中對甘油三酯含量的測定。正確的使用方法和妥善的保存條件對于保證測試結果的準確性至關重要。