要問科研怕遇到的糟心事,非買到科研試劑莫屬了,用試劑無非導(dǎo)致兩種結(jié)果:實(shí)驗(yàn)失敗or被動(dòng)學(xué)術(shù)造假。ELISA試劑盒門檻較低,制假相對(duì)簡單,常有不法商家打著種屬全、指標(biāo)全、現(xiàn)貨供應(yīng)的旗號(hào)來生產(chǎn)、銷售ELISA試劑盒,曾有老師吐槽“每個(gè)月都能收到好幾個(gè)從未聽過的廠商向我展示ELISA試劑盒"。針對(duì)ELISA試劑盒真假問題,我們整理了一些辨別經(jīng)驗(yàn)(購買前and購買后),希望對(duì)大家有所幫助!
購 買 前:
1.選擇正規(guī)公司
國產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè),比如晶抗生物。將“廠家名"、“ELISA試劑等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會(huì)有打假曝光平臺(tái)。正規(guī)廠商的ELISA試劑盒通常有技術(shù)發(fā)明支撐和ISO9001國際質(zhì)量體系認(rèn)證,且廠家會(huì)定期收集整理試劑盒的文獻(xiàn)引用情況,購買前可向廠家索要相關(guān)材料加以核實(shí)。
2.試劑盒性能參數(shù)
向廠家索要或從其下載產(chǎn)品說明書和質(zhì)控報(bào)告,查找ELISA試劑盒的關(guān)鍵質(zhì)控性能參數(shù):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。如果無法提供這些性能參數(shù)數(shù)據(jù),則說明試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),并未做試劑盒性能測試從而無法得到準(zhǔn)確真實(shí)的結(jié)果,也有極大可能是假貨試劑盒。
3. 不常見指標(biāo)的選擇
如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或ELISA試劑盒供應(yīng)商。其實(shí),“貨比三家"有時(shí)會(huì)有一些“驚喜",也許你會(huì)發(fā)現(xiàn):某個(gè)公司的說明書除了指標(biāo)名稱不一致,其他內(nèi)容基本一樣;某個(gè)指標(biāo),幾家公司試劑盒的性能參數(shù)一樣…一定要記?。宏P(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標(biāo)ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹(jǐn)慎也不為過。
4. 所有指標(biāo)常備現(xiàn)貨
抗體并不十分穩(wěn)定,針對(duì)非熱門研究指標(biāo),廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會(huì)長期備現(xiàn)貨,若承諾相對(duì)冷門的ELISA試劑盒能隨時(shí)發(fā)貨,那需謹(jǐn)慎考慮是否要選擇該供應(yīng)商。
購 買 后:
1.檢查
檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
2.實(shí)驗(yàn)
① 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原
a. 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;
b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體;
c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物;
d. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;
e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對(duì)的是目的抗原。
② 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假
a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條;
b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物;
e. 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,無則反之。
f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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